2022年医疗事业单位招聘临床专业面试：简述PCR技术检测基本原理、反应基本条件及其影响
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医疗事业单位招聘专业面试：简述PCR技术检测基本原理、反应基本条件及其影响
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性→退火→延伸三个基本反应步骤构成：
(1)模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便与引物结合，为下轮反应做准备。
(2)模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
(3)引物的延伸：DNA模板一引物结合物在Taq DNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。
重复循环变性、退火和延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，这种新链又可成为下次循环的模板，每完成一个循环需2-4分钟，2至3小时就能将目的基因放大几百万倍，达到检测要求。
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